مقایسه خصوصیات سینتیکی آنزیم لیپاز آزاد و تثبیت شده روی نانو ذره کیتوسان

فصل اول: مقدمات و کلیات

۱-۱-بیان مسئله

۱-۲-اهداف تحقیق

۱-۳-فرضیه های تحقیق

۱-۴- مفهوم نانوتکنولوژی

۱-۴-۱-کاربردهای نانوتکنولوژی

۱-۴-۱-۱- تولید مواد و محصولات صنعتی

۱-۴-۱-۲- پزشکی و بدن انسان

۱-۴-۱-۳- پایداری منابع

۱-۴-۱-۴- صنایع غذایی

۱-۵-آنزیم ها

۱-۵-۱-خصوصیات آنزیم ها

۱-۵-۲- خصوصیات واکنشهای آنزیمی

۱-۵-۳- پارامترهای موثر بر واکنشهای آنزیمی

۱-۵-۳-۱- دما

۱-۵-۳-۲-pH

۱-۵-۳-۳-بازدارنده­ها

۱-۵-۴- سینتیک واکنش آنزیمی

۱-۵-۵-عوامل موثر برسرعت و فعالیت آنزیمها

۱-۵-۵-۱-اثر غلظت ماده اولیه برسرعت واکنش آنزیمی

۱-۵-۶- معادله میکائیلیس- منتن

۱-۵-۷- معادله لینویور- برک

۱-۵-۸- آنزیم لیپاز

۱-۵-۸-۱-کاربرد لیپاز

۱-۵-۸-۲- سینتیک واکنش لیپاز

۱-۵-۸-۳-روش های اندازه­گیری فعالیت لیپاز

۱-۶- تثبیت آنزیم

۱-۶-۱- انتخاب پایه و روش مناسب جهت تثبیت آنزیم

۱-۷- کیتین و کیتوسان

۱-۷-۱- کیتین

۱-۷-۲- کیتوسان

۱-۷-۲-۱- کاربردهای کیتوسان

۱-۸-تعیین مشخصات نانوذرات کیتوسان

فصل دوم: ادبیات و پیشینه تحقیق

۲-۱-مروری برمطالعات آنزیمی

۲-۲-مروری بر پیشینه آنزیم لیپاز

۲-۳-تاریخچه تولید کیتین و کیتوسان

۲-۴-تاریخچه تثبیت آنزیم روی نانو ذرات

۲-۵-تحقیقات پیشین در این زمینه

فصل سوم: مواد و روش ها

۳-۱- مقدمه

۳-۲-مواد شیمیایی

۳-۳-وسائل و دستگاه های مورد نیاز

۳-۳-۱-ظروف آزمایشگاهی

۳-۳-۲-دستگاه­ها

۳-۴-روش­های آزمایشگاهی بکار گرفته شده در پایان نامه

۳-۴-۱-سنتز نانو ذرات کیتوسان

۳-۴-۲-تثبیت آنزیم لیپاز  به روش اتصال کووالان بر اساس واکنش باز شیف

۳-۴-۳-تعیین خصوصیات نانو ذره کیتوسان با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی

۳-۴-۴-تعیین توزیع اندازه ذرات نانوکیتوسان سنتز شده به روش تفرق نور با استفاده از زتاسایزر

۳-۴-۵-طیف سنجی مادون قرمز(FT-IR)

۳-۴-۶- اندازه­گیری پروتئین تام به روش برادفورد

۳-۴-۷-اندازه­گیری مقدار پروتئین (لیپاز) تثبیت شده بر روی نانوذره کیتوسان

۳-۴-۸-اندازه­گیری فعالیت آنزیم لیپاز

۳-۴-۸-۱-منحنی استاندارد فعالیت لیپاز

۳-۴-۸-۲-روش اول- اندازه­گیری فعالیت لیپاز به روش کیت پارس آزمون (کیت تشخیصی کمی Lipase DC)  در سرم یا پلاسما به روش فتومتریک

۳-۴-۸-۳-روش دوم- اندازه­گیری فعالیت لیپاز با استفاده از سوبسترای پارانیتروفنیل پالمیتات (pNPP)

۳-۴-۹- بررسی اثر دما بر فعالیت آنزیم لیپاز در حالت آزاد و تثبیت شده روی نانو کیتوسان

۳-۴-۱۰-بررسی اثر pH بر فعالیت آنزیم لیپاز در حالت آزاد و تثبیت شده روی نانو کیتوسان

۳-۴-۱۱-بررسی پارامتر های سینتیکی آنزیم لیپاز آزاد و تثبیت شده روی نانو ذره کیتوسان

فصل چهارم: نتایج

۴-۱-مقدمه

۴-۲-تصویر برداری میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM)

۴-۳-طیف سنجی مادون قرمز تبدیل فوریه (FT-IR)

۴-۴-توزیع اندازه نانوذرات سنتز شده با استفاده از زتا سایزر

۴-۵-فعالیت لیپاز سودوموناس آزاد و تثبیت شده روی نانوذره کیتوسان

۴-۶-بررسی اثر pH بر فعالیت آنزیم لیپاز سودوموناس آزاد و تثبیت شده روی نانوذره کیتوسان

۴-۷-مقایسه درصد فعالیت نسبی آنزیم لیپاز آزاد و تثبیت شده در pH های مختلف

۴-۸-بررسی اثر دما بر فعالیت آنزیم لیپاز سودوموناس آزاد و تثبیت شده روی نانو ذره کیتوسان

۴-۹-مقایسه درصد فعالیت نسبی آنزیم لیپاز آزاد و تثبیت شده در دماهای مختلف

۴-۱۰-پارامترهای سینتیکی آنزیم لیپازسودوموناس آزاد و تثبیت شده روی نانو ذره کیتوسان

فصل پنجم: بحث و نتیجه­ گیری

بحث

نتیجه گیری

مشکلات وپیشنهادات