بررسی ارتباط پیوستگی بین هموگلوبین D و انواع هاپلوتیپ های مجموعه ژنی بتاگلوبین در افراد مازندرانی

مقدمه: هموگلوبین دی – پنجاب یکی از انواع هموگلوبینوپاتی ها می باشد که در آن جهش در موقعیت ۱۲۱ بر روی زنجیره بتا رخ داده است. این اختلال هموگلوبین در هندوستان، پاکستان و ایران شایع می باشد.افراد هتروزیگوت برای این بیماری غالباً بدون علامت بالینی خاصی می باشند، در حالی که در حالت هتروزیگوت مرکب با هموگلوبین S افراد مبتلا، کم خونی داسی شکل را بروز می دهند. مطالعه قبلی درشمال کشور نشان داد که تمامی واریانت های هموگلوبین دی درساری از نوع دی – پنجاب می باشند ولی نوع هاپلوتیپ های همراه این واریانت شناخته نشده بود. هدف از این مطالعه شناسایی انواع هاپلوتیپ های همراه هموگلوبین دی در مجموعه ژنی بتاگلوبین بوده است. مواد و روش­ها: در بررسی حاضر تعداد ۱۸ نفر از خانواده های افرادی که دارای هموگلوبین دی – پنجاب بوده اند انتخاب گردیدند و DNA ژنومی از تمامی افراد با استفاده از روش استاندارد نمک اشباع استخراج گردید. سپس نوع هاپلوتیپ همراه هموگلوبین دی – پنجاب با استفاده از تکنیک PCR-RFLP و آنالیز پیوستگی در خانواده مشخص شد.نتیجه: مطالعه حاضر نشان داد که در ۱۷ خانواده از ۱۸ خانواده بررسی شده آلل هموگلوبین دی با هاپلوتیپ     [ پیوستگی دارد. و در تنها یک خانواده نیز آلل دارای هموگلوبین دی به همراه هاپلوتیپ دیده شد.بحث و نتیجه­ گیری: مطالعه ما نشان داد بخش عمده واریانت هموگلوبین دی – پنجاب در ساری دارای منشاء یگانه می باشند و هاپلوتیپ نادر دیده شده احتمالا یا منشاء ژنتیکی متفاوتی دارد یا در اثر مکانیسم هایی از قبیل نوترکیبی ژنی به وجود آمده است

نوع فایل :word 

تعداد صفحات :۶۴

*———————————–*

فصل اول: مقدمه

۱ـ۱ بیان مسئله:

۱ـ۱ـ۱ هموگلوبین

۱ـ۱ـ۲ ساختمان هموگلوبین

۱ـ۱ـ۳ بیان تکوینی هموگلوبین

۱ـ۱ـ۴ ساختمان زنجیره گلوبین

۱ـ۱ـ۵ خوشه ژنی آلفاگلوبین

۱ـ۱ـ۶ خوشه ژنی بتاگلوبین

۱ـ۱ـ۷ ناهنجاری های هموگلوبین در انسان

۱ـ۱ـ۸ اختلالات هموگلوبینهای  انسانی

۱ـ۱ـ۹ واریانت های ساختمانی زنجیره گلوبین

۱ـ۱ـ۱۰ بیماری های سنتز زنجیره هموگلوبین

۱ـ۱ـ۱۱ تالاسمی

۱ـ۱ـ۱۲ مروری برهموگلوبینوپاتی های نادر گزارش شده در ایران

۱ـ۱ـ۱۳ هموگلوبین D

۱ـ۱ـ۱۴ هاپلوتیپ

۱ـ۱ـ۱۵ هاپلوتیپ های مجموعه ژنی بتاگلوبین

۱ـ۲ اهداف

۱ـ۲ـ۱ هدف کلی طرح:

۱ـ۲ـ۲ اهداف فرعی طرح:

۱ـ۲ـ۳ اهداف اختصاصی طرح:

۱ـ۲ـ۴ اهداف کاربردی طرح:

۱ـ۲ـ۵ فرضیههای طرح:

فصل دوم: مروری بر تحقیقات انجام شده

۲ـ۱ پیش زمینه

۲ـ۲ تحقیقات و نتایج گذشته

فصل سوم: مواد و روش­ها

۳ـ۱ مواد و روشها

۳ـ۱ـ۱ مواد، تجهیزات و لوازم مورد استفاده

۳ـ۱ـ۱ـ۱ لیست دستگاهها و لوازم مورد استفاده برای اجرای این پایان نامه در جدول ۳-۱ آمده است.

۳ـ۱ـ۱ـ۲ مواد

۳ـ۱ـ۱ـ۲ـ۱ مواد مصرفی عمومی

۳ـ۱ـ۱ـ۲ـ۲ مواد مصرفی شیمیایی

۳ـ۱ـ۱ـ۲ـ۳ مواد مصرفی بیولوژیک

۳ـ۱ـ۱ـ۲ـ۴ محلولها

۳ـ۱ـ۱ـ۲ـ۴ـ۱ محلولهای لازم جهت استخراج

۳ـ۱ـ۱ـ۲ـ۴ـ۲ محلولهای لازم جهت واکنش PCR

۳ـ۱ـ۱ـ۲ـ۴ـ۳ محلول های لازم جهت الکتروفورز کردن DNA

۳ـ۱ـ۲ روشها:

۳ـ۱ـ۲ـ۱ بیماران مورد مطالعه

۳ـ۱ـ۲ـ۲ استخراج DNA ژنومی به روش نمک اشباع

۳ـ۱ـ۲ـ۳  تعیین کمیت و کیفیت DNA استخراج شده

۳ـ۱ـ۲ـ۴  واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR)

۳ـ۱ـ۲ـ۵ تهیه ژل آگارز و الکتروفورز محصولات PCR

۳ـ۱ـ۲ـ۶ رنگ آمیزی با اتیدیوم برماید و عکسبرداری از ژل

فصل چهارم: نتایج

۴ـ۱ نتایج

۴ـ۱ـ۱ جمعیت مورد مطالعه

۴ـ۱ـ۲ بررسی نتایج شناسایی هموگلوبین D

۴ـ۱ـ۳ بررسی نتایج جایگاههای مجموعه ژنی بتاگلوبین:

۴ـ۱ـ۴ بررسی جهش‌ها به روش حضور و یا عدم حضور جایگاه شناسایی آنزیم محدودکننده (RFLP)

۴ـ۱ـ۵ بررسی هفت جایگاه درمجموعه ژنی بتاگلوبین به منظورشناسایی هاپلوتیپها توسط تکنیکRFLP-PCR :

۴ـ۱ـ۶ آنالیز دادهها

فصل پنجم: بحث و پیشنهادات

۵ـ۱ بحث

۵ـ۲ نتیجه گیری

۵ـ۳ پیشنهادات