طراحی و استقرار روش جدید سم زدایی سریع از واکسن سیاه سرفه

فصل اول: کلیات

۱-۱٫ بیان مسئله

۱-۲٫ تاریخچه بیماری سیاه سرفه

۱-۳٫ باکتریولوژی

۱-۴٫ ترکیبات مهم باکتری سیاه سرفه

۱-۴-۱٫ توکسین پرتوسیس

۱-۴-۲٫ فیلامنتوس هموگلوتینین (FHA)

۱-۴-۳٫ فیمبریه و آگلوتینین ها

۱-۴-۴٫ پرتکتین

۱-۴-۵٫ آدنیلات سیکلاز (ACT)

۱-۴-۶٫ تراکئال سایتو توکسین (TCT)

۱-۴-۷٫ توکسین حساس به حرارت

۱-۴-۸٫ BrKA

۱-۴-۹٫ اندوتوکسین

۱-۵٫ سویه های بوردتلا پرتوسیس

۱-۶٫ اپیدمیولوژی

۱-۶-۱٫ وضعیت بیماری در ایران

۱-۷٫ بیماری زایی سیاه سرفه

۱-۸٫ علائم کلینیکی

۱-۹٫ تشخیص بیماری

۱-۹-۱٫ تشخیص بالینی

۱-۹-۲٫ علائم کلینیکی در نوزادان

۱-۹-۳٫ کودکان، نوجوانان و بزرگسالان

۱-۱۰٫ پاسخ ایمنی در برابر سیاه سرفه

۱-۱۰-۱٫ پاسخ ایمنی همورال

۱-۱۰-۲٫ پاسخ ایمنی سلولی

۱-۱۱٫ روش های آزمایشگاهی تشخیص.

۱-۱۱-۱٫ کشت

۱-۱۱-۲٫ سرولوژی

۱-۱۱-۳٫ PCR

۱-۱۲٫ مدیریت بیماری

۱-۱۳٫ پیشگیری

۱-۱۳-۱٫ راهبردهای بالقوه در مهار بیماری سیاه سرفه در اوایل نوزادی

۱-۱۳-۱-۱٫ واکسیناسیون بالغین و سالمندان

۱-۱۳-۱-۲٫ حفاظت غیرمستقیم نوزادان از طریق واکسیناسیون والدین

۱-۱۳-۱-۳٫ ایمن سازی نوزادان و کودکان

۱-۱۳-۱-۴٫ واکسیناسیون مادر در دوران بارداری

۱-۱۴٫ استراتژی های واکسن

۱-۱۴-۱٫ واکسن غیر سلولی سیاه سرفه

۱-۱۴-۲٫ واکسن سلولی سیاه سرفه

فصل دوم: مروری بر متون گذشته

۲-۱٫ تاریخچه تولید واکسن سیاه سرفه

۲-۱-۱٫ تعریف تست کنترل سمیت زدایی (MWGT)

۲-۱-۲٫ تعریف تست حفاظتی داخل مغزی موش (تست توانمندی Potency test)

۲-۱-۳٫ ابداع روش کشت

۲-۱-۴٫ جداسازی سلول باکتری از کشت

۲-۲٫ تاریخچه تولید واکسن سیاه سرفه در انستیتو رازی

۲-۳٫ غیرفعال سازی سوسپانسیون سلولی باکتری سیاه سرفه

۲-۳-۱٫ استفاده از فرمالین و تیومرسال برای سمیت زدایی سوسپانسیون سلولی سیاه سرفه

۲-۳-۲٫ استفاده از گلوتار آلدهید برای سمیت زدایی سوسپانسیون سلولی سیاه سرفه

۲-۳-۳٫ استفاده از حرارت برای سمیت زدایی سوسپانسیون سلولی سیاه سرفه

فصل سوم: مواد و روش ها

۳-۱٫ تجهیزات و وسایل

۳-۲٫ مواد و محیط ها

۳-۲-۱٫ محیط کشت آگار بورده ژانگو

۳-۲-۲٫ محیط کشت وِروِی

۳-۲-۳٫ محیط B2

۳-۲-۴٫ محیط کشت سویابین کازئین

۳-۲-۵٫ محیط تیوگلیکولات براث

۳-۳٫ روش کار

۳-۳-۱٫ انتخاب سویه های بوردتلا پرتوسیس

۳-۳-۱-۱٫ لیوفیلیزه کردن

۳-۳-۲٫ کشت باکتری سیاه سرفه

۳-۳-۲-۱٫ کشت تجدید حیات روی محیط بورده ژانگو

۳-۳-۲-۲٫ کشت بذر روی محیط وِروِی

۳-۳-۲-۳٫ مراحل انجام کشت فرمانتوری باکتری سیاه سرفه

۳-۳-۲-۳-۱٫ استریلیزاسیون فرمانتور

۳-۳-۲-۳-۲٫ آماده سازی و بهینه سازی محیط کشت فرمانتوری

۳-۳-۲-۳-۳٫ تلقیح بذر به محیط کشت در فرمانتور

۳-۳-۳٫ جداسازی باکتری سیاه سرفه از محیط کشت

۳-۳-۳-۱٫ جداسازی سلول باکتری با استفاده از سانتریفوژ

۳-۳-۳-۲٫ جداسازی سلول باکتری با استفاده از سیستم میکرو فیلتراسیون

۳-۳-۴٫ غیرفعال سازی سلول باکتری سیاه سرفه

۳-۳-۵٫ سمیت زدایی سوسپانسیون باکتری سیاه سرفه

۳-۳-۵-۱٫ سمیت زدایی با استفاده از فرمالین

۳-۳-۵-۲٫ سمیت زدایی با استفاده از تیومرسال

۳-۳-۶٫ تست های کنترلی سوسپانسیون سیاه سرفه

۳-۳-۶-۱٫ تست استریلیتی

۳-۳-۶-۲٫ تست کنترل غیرفعال بودن باکتری

۳-۳-۶-۳٫ تست کنترل سمیت زدایی (MWGT)

۳-۳-۶-۴٫ تست توانمندی

فصل چهارم: نتایج

۴-۱٫ تجدید حیات بذر بر روی محیط بورده ژانگو

۴-۲٫ تهیه بذر در محیط وِروِی

۴-۳٫ کشت فرمانتوری باکتری سیاه سرفه برای تولید واکسن

۴-۴٫ جداسازی باکتری سیاه سرفه از کشت

۴-۵٫ غیرفعال سازی و سمیت زدایی باکتری سیاه سرفه برای تولید واکسن

۴-۵-۱٫ سمیت زدایی با فرمالین

۴-۵-۲٫ سمیت زدایی با تیومرسال

۴-۶٫ آزمایش های کنترلی سوسپانسیون های سیاه سرفه

۴-۷٫ نتایج حاصل از آزمون MWG در کنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سلولی سیاه سرفه

سمیت زدایی شده با فرمالین و تیومرسال

۴-۸٫ آزمون MWG و مقایسه تغییرات اوزان موش ها

۴-۹٫ تست توانمندی واکسن های آزمایشی سیاه سرفه

فصل پنجم: بحث و پیشنهادات

بحث

نتیجه گیری و پیشنهادات