مطالعه ارتباط موتاسیون های ژن های VDR و VEGF با سقط مکرر در زنان ایرانی

سقط مکرر شایع ترین رویداد پزشکی ، که در طول ۳ ماهه اول در ۲۰% از بارداری ها رخ می‌دهد. سقط مکرر از بیماریهایی است که بسیاری از زوجها از آن رنج می برندعوامل متعددی برای این سندرم ذکر شده است که یکی از علل مطرح آن موتاسیون در ژن های رسپتور ویتامین D وفاکتور رشد اندوتلیال عروقی در مادران باردار و به دنبال آن سقط جنین است.نظر به اینکه جمعیت مردم ایران از نظر ژنتیکی با جمعیتهای دیگر متفاوت است ، لذا موتاسیون ژنهای فاکتور رشد اندوتلیال عروقی در ایران ممکن است با دیگر جوامع متفاوت باشد لذا این مطالعه میتواند تصویری از ترکیب ژنی مردم ایران در ارتباط با موتاسیون های مربوط به ژنهای فاکتور رشد اندوتلیال و احتمالا ارتباط آنها با سقط مکرر را مشخص کند. لذادر مورد ارتباط رسپتور ویتامین D و سندرم سقط مکرر گزارشی دیده نشده استروش کار:این بررسی با ژنوتیپ کردن نمونه DNA گروه بیماران (Case) و گروه سالم (Control) و مقایسه فراوانی این موتاسیون ها در دو گروه به وسیله آزمون x ² انجام میگیرد آنالیز نتایج حاصل از این مرحله ، ژنوتیپهای ایجادکننده ریسک برای موتاسیون های مذکور و همچنین ریسک نسبی ایجاد شده را با محاسبه ((Odd Ratio مشخص خواهد نمود در نهایت میزان ارتباط هر یک از این موتاسیون ها به صورت هموزیگوت و هتروزیگوت به طور جداگانه و نیز بصورت هتروزیگوت مرکب (دو یا چند موتاسیون هم زمان ) با شیوع سقط مکرر در زنان با تفسیر نتایج و اطلاعات بدست آمده ، مورد بررسی قرار خواهدگرفت.نتایج:فراوانی های ژنوتیپی و آللی دو پلی مورفیسمسم ۹۳۶C/T،FOKIT/C از ژنVDR,VEGFهیچ تفاوت معنی داری را بین گروه بیمار و کنترل نشان نداد. در مقابل فراوانی ژنوتیپی در پلی مورفیسم ۲۵۷۸C/Aتفاوت معنی داری را بین بیماران و کنترل نشان داد.با توجه به  تاثیر و اهمیت تروفوبلاست ، رگهای جنینی و رشد سلول های خونی جنینی و مادری در سندرم سقط مکرر توجه به VEGF و بررسی تاثیر پلیمورفیسم های این ژن در سقط مکرر ضروری می باشد.از آنجاییکه مشاهداتی مبنی بر ارتباط معنی دار ژن VDR با سرطان وپارگی زودرس غشا ملاحظه کردیم .لازم دانستیم ارتباط این ژن را با سندرم سقط مکررکه گزارشی از آن منتشر نشده مورد بررسی قرار دهیم.

نوع فایل :word

تعداد صفحات :۸۸

*———————————–*

۱- کلیات

۱-۱- مقدمه

۱-۲- بیان مسئله

۱-۳- ضرورت پژوهش

۱-۴- اهداف پژوهش

۱-۵- چارچوب انجام پژوهش

۱-۵-۱- سقط مکرر

۱-۵-۲- علل سقط

۱-۵-۳- ژنتیک

۱-۵-۴- ترومبوفیلیا

۱-۵-۵- عوامل آناتومیک

۱-۵-۶- اختلالات آندوکرین

۱-۵-۷- علل عفونی

۱-۵-۸- علل ایمنی.

۱-۵-۹- عوامل دیگر

۱-۶- سیستم ایمنی

۱-۶-۱- ایمنی اکتسابی

۱-۶-۲- ایمنی ذاتی

۱-۶-۳- سیستم ایمنی و بارداری

۱-۷- ویتامین D3

۱-۷-۱- سنتز ویتامین D3

۱-۷-۲- کلیات مکانیسم اثر ویتا مین D3

۱-۷-۳- اثرات calcitriol بر سیستم ایمنی

۱-۷-۴- ۱٫۲۵(OH)2D3 و سیستم ایمنی

۱-۷-۵- ویتامین D3 وبارداری

۱-۸- رگ زاﯾﯽ

۱-۸-۱- ﻓﺎﮐﺘﻮر رﺷﺪ اﻧﺪوﺗﻠﯿﺎل ﻋﺮوﻗﯽ (VEGF)

۱-۸-۲- گیرﻧﺪه ﻫﺎی ‪VEGF

۱-۸-۳- ﻋﻤﻠﮑﺮد ‪VEGFو نقش آن در بارداری

۲- مروری بر مطالعات گذشته

۲-۱- مقدمه

۳- روش بررسی

۳-۱- جمعیت مورد مطالعه

۳-۲- استخراج DNA به روش( Salting out)

۳-۲-۱- تهیۀ محلولهای مورد نیاز

۳-۳- بررسی کمی و کیفی استخراج DNA

۳-۳-۱- بررسی کمی DNA استخراج شده با اسپکتروفوتومتر

۳-۳-۲- مواد و وسایل لازم

۳-۳-۳- مراحل انجام کار

۳-۳-۴- محاسبه غلظت DNA

۳-۳-۵- بررسی کیفیDNA.

۳-۴- ژنوتایپ کردن نمونهها (ژنوتایپینگ)

۳-۴-۱- انتخاب پرایمرهای مناسب برای هر موتاسیون

۳-۵- واکنش زنجیرهای پلی مراز.

۳-۵-۱- مواد و وسایل لازم

۳-۵-۲- روش کار

۳-۵-۳- الکتروفورز ژل آگارز

۳-۵-۴- طرز تهیه بافر Χ۱

۳-۵-۵- طرز تهیه ژل آگارز

۳-۵-۶- روش کار جهت Run کردن نمونه ها روی ژل آگارز

۳-۶- چندشکلی در طول قطعات محدود

۳-۷- روش انجام RFLP بر روی محصولات PCR

۳-۸- روشهای آماری مورد استفاده

۴- نتایج و یافته ها

۴-۱- بررسی کیفیت DNA های استخراج شده

۴-۲- نتایج PCR

۴-۳- نتایج RFLP

۴-۳-۱- پلی مورفیسم خانواده VEGF

۴-۳-۲- پلی مورفیسم C/T 936:

۴-۳-۳- پلیمورفیسم FOKI

۴-۳-۴- پلی مورفیسم ۲۵۷۸ در ژن VEGF

۴-۳-۵- پلی مورفیسمC/T 936 در ژن VEGF:

۴-۳-۶- پلی مورفیسم ۲۷۸۲۳ در ژنVDR:

۴-۳-۷- بررسی سطح سرمی ویتامین D  باپلی مورفیسم FOKIدر ژن رسپتور ویتامین D:

۴-۴- بررسی نتایج آماری:

۵- بحث ونتیجه گیری