بررسی مقاومت افزایش یافته به آنتی بیوتیک‌های گروه آمینوگلیکوزیدی

فصل اول کلیات

۱- کلیات

۱-۱- مقدمه

۱-۲- بیان مسئله

۱-۳- انتروکوک ها

۱-۳-۱- طبقه بندی

۱-۳-۲- خصوصیات بیولوژیک

۱-۳-۳- تقسیم‌بندی ﻣﻮﻟﮑﻮﻟﯽ

۱-۳-۴- ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ انتروکوکوس فکالیس

۱-۳-۵- فاکتورهای ویرولانس (بیماری زایی)

۱-۳-۵-۱- ﻣﻮاد ﺗﺠﻤﻌﯽ

۱-۳-۵-۲- سیتولیزین

۱-۳-۵-۳- ژلاتیناز

۱-۳-۵-۴- فرومون ها

۱-۳-۵-۵- ﻟﯿﭙﻮﺗﯿﮑﻮﺋﯿﮏ اسید

۱-۳-۵-۶-  ﻫﻤﻮﻟﯿﺰﯾﻦ اﻧﺘﺮوﮐﻮکوس فکالیس

۱-۳-۵-۷-  آﻧﺘﯽ ژن آﻧﺪوﮐﺎردﯾﺘﯽ اﻧﺘﺮوﮐﻮکوس ﻓﮑﺎﻟﯿﺲ ((EfaA

۱-۳-۵-۷-۱- ﭘﺮوﺗﺌﯿﻦ

۱-۳-۵-۸- ادهسین ﮐﻼژن  اﻧﺘﺮوﮐﻮکوس ﻓﮑﺎﻟﯿﺲ (ACE)

۱-۴- اپیدمیولوژی انتروکوکوس فکالیس

۱-۵- اهمیت بالینی

۱-۵-۱- بیماریزایی:

۱-۵-۱-۱- باکتریمی:

۱-۵-۱-۲- ﻋﻔﻮﻧﺖ ﻣﺠﺎری ادراری:

۱-۵-۱-۳- اندوکاردیت

۱-۵-۱-۴- ﻋﻔﻮﻧﺖ ﻫﺎی داﺧﻞ ﺷﮑﻤﯽ، ﻟﮕﻨﯽ و ﺑﺎﻓﺘﻬﺎی ﻧﺮم

۱-۵-۱-۵- ﺳﺎﯾﺮﻋﻔﻮﻧﺘﻬﺎی اﻧﺘﺮوکوکی

۱-۶- درمان

۱-۷- مقاومتهای آنتی بیوتیکی

۱-۷-۱- ﻣﻘﺎوﻣﺖ آﻧﻬﺎ ﺑﻪ ﮔﻠﯿﮑﻮﭘﭙﺘﯿﺪﻫﺎ

۱-۷-۲- ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﻪ آﻧﺘﯽ ﺑﯿﻮﺗﯿﮑﻬﺎی ﺑﺘﺎﻻﮐﺘﺎم

۱-۷-۳- ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﻪآنتی بیوتیکهای ﺗﺘﺮاﺳﺎﯾﮑﻠﯿﻦ

۱-۷-۴- مقاومت در برابر آنتی بیوتیک های ماکرولیدی

۱-۷-۵-  ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﻪ ﮐﻠﺮاﻣﻔﻨﯿﮑﻞ

۱-۷-۶- مقاومت به آمینوگلیکوزید ها

۱-۷-۶-۱- تاریخچه روند گسترش مقاومتهای آمینوگلیکوزیدی

۱-۷-۶-۲- انواع مقاومت به آمینوگلیکوزیدها

۱-۷-۶-۳- اهمیت مقاومت آمینوگلیکوزیدی

۱-۷-۷- ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﭼﻨﺪ داروﺋﯽ

۱-۷-۸- HLAR و افزایش مرگ و میز (Mortality)

۱-۸- PCR

۱-۸-۱- Multiplex PCR

۱-۸-۲- طراحی و اجرای Multiplex PCR

۱-۸-۳- تیتراسیون اجزای واکنش:

۱-۸-۴- شرایط ترموسایکلر:

۱-۹- تعریف واژه ها

فصل دوم ( مبانی و تاریخچه)

۲- مروری بر منابع

فصل سوم مواد و روش ها

۳- مواد و روش ها

۳-۱- ﻧﮕﻬﺪاری ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎ:

۳-۲- ﻣﺤﯿﻂ ﻫﺎی ﮐﺸﺖ ﻣﻮرد اﺳﺘﻔﺎده

۳-۳- لوازم و تجهیزات مورد استفاده

۳-۴- محلولهای مورد استفاده و نحوه تهیه آنها

۳-۵- آزمایش‌های بیوشیمیایی

۳-۵-۱- ﺗﺴﺖ ﮐﺎﺗﺎﻻز

۳-۵-۲- ﺗﻤﺎﯾﺰاﻧﺘﺮوکوک­ها از ﺳﺎﯾﺮ اﺳﺘﺮﭘﺘﻮکوک­ها

۳-۵-۳- ﮐﺸﺖ ﺑﺮ روی ﺑﺎﯾﻞ اﺳﮑﻮﻟﯿﻦ آﮔﺎر

۳-۵-۴-  ﺗﺴﺖ ﺗﺨﻤﯿﺮ ﻗﻨﺪآراﺑﯿﻨﻮز

۳-۶- رﺷﺪ در ۱۰ و ۴۵ درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﯿﮕﺮاد

۳-۷- ﺗﻌﯿﯿﻦ اﻟﮕﻮی ﺣﺴﺎﺳﯿﺖ آﻧﺘﯽ ﺑﯿﻮﺗﯿﮑﯽ انتروکوکوس فکالیس

۳-۷-۱- استاندارد نیم مک فارلند سولفات باریم:

۳-۷-۲- آﻣﺎده ﮐﺮدن ﺳﻮﺳﭙﺎﻧﺴﯿﻮن ﺑﺎﮐﺘﺮی :

۳-۷-۳- روش اﻧﺠﺎم آزﻣﺎﯾﺶ:

۳-۷-۴- بررسی مقاومت افزایش یافته به جنتامایسین و استرپتومایسین

۳-۷-۵- اﺳﺘﺨﺮاج DNA

۳-۷-۵-۱- استخراج از باکتری کشت داده شده :

۳-۷-۶- اندازه‌گیری غلظت DNA ژنومیک تخلیص شده

۳-۷-۷- انتخاب و تهیه پرایمر‌های مناسب

۳-۷-۷-۱- محلول کار پرایمر PCR

۳-۷-۸- روش اجرا Multiplex PCR

۳-۷-۸-۱- PCR Amplification:

۳-۷-۹- آشکارسازی محصولات PCR

۳-۷-۱۰- روش انجام الکتروفورز:

۳-۸- روش تجزیه و تحلیل داده ها:

۳-۹- ملاحظات اخلاقی:

۳-۱۰- مشکلات ومحدویت ها:

۳-۱۱- متغیر ها:

فصل چهارم

۴- نتایج مطالعه

۴-۱- نتایج مربوط به تست بیوشیمیایی

۴-۲- نتایج مربوط تفکیک جنسیت تمام نمونه ها

۴-۳- نتایج مربوط به تفکیک جنسیت  تمام نمونه ها

۴-۴- نتایج مربوط به تفکیک گروه های سنی

۴-۵- نتایج مربوط به حساسیت آنتی بیوتیکی

۴-۵-۱- نتایج بررسی مقاومت افزایش یافته به جنتامایسین و استرپتومایسین

۴-۶- نتایج مربوط به واکنش زنجیره ای پلی مراز

۴-۶-۱- استخراج ژنوم

۴-۶-۲- واکنش  PCR

۴-۶-۳- نتایج مربوط به الکتروفورز محصولات PCR :

فصل پنجم بحث و پیشنهادات